Листериоз

– инфекционное заболевание из группы антропозоонозов; характеризуется полиморфизмом клинических проявлений. Острые формы протекают в виде гнойных, менингоэнцефалитов, сепсиса, хронические - чаще в виде рецидивирующего воспаления мочевыводящих путей. Хранители инфекции в природе — мышевидные грызуны. Возбудитель Л. выделен также из клещей. Человек заражается обычно от животных при применении в пищу молока, мяса, яиц, инфицированных листериями, при укусе зараженных членистоногих, а также возможно заражение воздушно- пылевым путем через слизистые оболочки дыхательных путей, через конъюнктиву глаза и поврежденные кожные покровы, половым путем и, что особенно опасно трансплацентарным. Больной человек или бактерионоситель, выделяющий листерию с мочой, калом, вагинальными и другими секретами также является источником инфекции.

Поэтому в последнее время листериоз у людей привлекает внимание ученых всего мира, как опасное заболевание, приводящее к внутриутробной гибели плода, смерти при рождении, внутриутробным порокам развития, менингитам, септицемии, эндокардитам, гепатитам и тяжелым вторичным иммунодефицитам.

Согласно приказам МЗ Украины № 558 от 11 августа 2006 г. «Про затвердження Гігієнічних нормативів вмісту бактерій Listeria monocytogenes у харчових та продовольчій сировині” и № 559 от 11 августа 2006 года «Про затвердження методичних вказівок „Організація контролю і методи виявлення бактерій рода Listeria monocytogenes у харчових та продовольчій сировині” в настоящее время является обязательным контроль пищевых продуктов при проведении санитарно-эпидемиологического надзора, а также при проведении противоэпидемических мероприятий при возникновении вспышек. Проведение контроля на Listeria monocytogenes позволит получить реальную картину ситуации в Украине, оценить степень загрязненности пищевой продукции и дать оценку принимаемых мер.

Сущность метода выявления Listeria monocytogenes основана на высеве определенного количества исследуемого материала в жидкие селективные среды, инкубирование посевов, пересев на агаризованные дифференциально-диагностические среды, проведение подтверждающих тестов родовой и типовой идентификации, которые включают окраску по Грамму, определение подвижности, определение способности бактерий восстонавливать нитриты до нитратов, сбраживать рамнозу, ксилозу и маннит, определение способности к гидролизу лецитина и бета-гемолизу а также проведение КАМП-теста.

Данный метод гармонизированный с Международным стандартом ISO 11290-1:1996.

 

Краткая схема выделения и идентификации Listeria monocytogenes

 

МАТЕРИАЛ

25 г (мл) исследуемого продукта (гомогената, смыва с поверхности)

 

ПЕРВИЧНОЕ ОБОГАЩЕНИЕ

Основа бульон Фрейзера М 1327

Добавка Фрейзера FD 141

Селективная добавка Фрейзера FD 125I

Термостатирование при 37^о С 24 часа

 

ВТОРИЧНОЕ ОБОГАЩЕНИЕ***

Основа бульон Фрейзера (М 1327)

Добавка Фрейзера FD 141

Селективная добавка Фрейзера FD 125I

Термостатирование при 37^о С 48 часов

 

ВЫДЕЛЕНИЕ

Основа Оксфордской среды для листерий М1145

Оксфордская добавка для листерий FD 071

или

Агар для идентификации листерий (ПАЛКАМ) М1064

Селективная добавка для листерий FD061

Термостатирование при 37^о С 24- 48 часов

 

ВЫДЕЛЕНИЕ ЧИСТОЙ КУЛЬТУРЫ

Отбирают 5 типичных колоний зеленого цвета с черным ореолом

Подозрительные колонии пересевают на

Дрожжевой триптон-соевый агар М 1214

 

ПОДТВЕРЖДЕНИЕ

Идентификация выделенных культур:

1. Окраска по Грамму – Набор для окраски по грамму
2. Определение каталазной активности
3. Выявление бета-гемолитической активности – Основа кровяного агара М 144 + баранья кровь

***- При посеве с низким исходным уровнем контаминации и при отсутствии роста в жидкой среде (помутнение, почернение и др.) допускается проводить только первичное обогащение